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    cytoskeleton-BlastR™過濾系統(tǒng) 介紹

    發(fā)布時(shí)間: 2024-05-29  點(diǎn)擊次數(shù): 431次

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    BlastR™過濾系統(tǒng)

    概述

    BlastR™裂解過濾系統(tǒng)允許用戶使用變性緩沖液從所有細(xì)胞隔室中捕獲蛋白質(zhì),以獲得相對于標(biāo)準(zhǔn)非變性緩沖液更完整的蛋白質(zhì)圖譜。變性緩沖液的一個(gè)顯著缺點(diǎn)是粘性基因組DNA污染,這可能干擾蛋白質(zhì)分析、蛋白質(zhì)在SDS-PAGE凝膠上的遷移以及干擾免疫沉淀測定。

    BlastR™過濾器從變性細(xì)胞裂解緩沖液提取物中去除粘性基因組DNA,同時(shí)將處理時(shí)間縮短至不到一分鐘。專有過濾技術(shù)基于可壓縮聚氨酯過濾器,具有捕獲基因組DNA的最佳孔徑。過濾器的可壓縮性質(zhì)允許樣品的最大回收率,通常為原始體積的90%

    有兩種版本可供選擇:1)過濾器加緩沖液版本(Cat.#BLR01,包括;BlastR™裂解緩沖液),開發(fā)為

    BlastR快速過濾套件

    BlastR快速過濾套件(50個(gè)過濾器)

    SKU BLR02

    數(shù)據(jù)表

    MSDS

    數(shù)量/包裝

    BlastR™過濾器與變性緩沖液(如胍、尿素或通常產(chǎn)生豐富粘度的高SDS基提取緩沖液)結(jié)合使用時(shí),可以快速可靠地制備無基因組DNAgDNA)的細(xì)胞裂解物,用于蛋白質(zhì)印跡或免疫沉淀。gDNA污染是變性緩沖液的一個(gè)重要問題,變性緩沖液可能干擾下游應(yīng)用,如SDS-PAGE中蛋白質(zhì)的免疫沉淀和遷移。與超聲處理或胰島素針gDNA剪切方法不同,BlastR™過濾器可有效去除gDNA污染,同時(shí)對裂解物中蛋白質(zhì)的完整性沒有影響。

    產(chǎn)品用途包括

    降低樣品粘度

    蛋白質(zhì)提取物的快速分離

    變性裂解緩沖液提取物的制備

    驗(yàn)證數(shù)據(jù):Blaster快速過濾套件白書

    BlastR過濾器設(shè)置50個(gè)單元。

    BlastR™裂解物gDNA的澄清

    A) 將粘性樣品裂解液裝載到BlastR™過濾器上。

    B) 樣品通過捕獲gDNA的過濾系統(tǒng)。>細(xì)胞裂解物中蛋白質(zhì)的回收率為90%

    Signal Seeker™泛素檢測試劑盒(30份)

    信號(hào)導(dǎo)引頭泛素化檢測試劑盒(30個(gè)測定,免疫沉淀格式)

    SKU BK161

    數(shù)據(jù)表

    MSDS

    數(shù)量/包裝

    Signal Seeker™生產(chǎn)線的開發(fā)允許專家和非專家對關(guān)鍵的調(diào)節(jié)蛋白修飾進(jìn)行簡單分析。全面的Signal Seeker™試劑盒提供了一個(gè)親和珠系統(tǒng),用于從任何給定的細(xì)胞或組織裂解物中分離和富集修飾蛋白。然后使用靶蛋白的一級(jí)抗體通過標(biāo)準(zhǔn)的蛋白質(zhì)印跡程序分析富集的蛋白質(zhì)群體。

    產(chǎn)品用途包括

    調(diào)查瞬態(tài)調(diào)節(jié)機(jī)制

    測量多途徑成員蛋白的信號(hào)事件

    發(fā)現(xiàn)感興趣的蛋白質(zhì)的新修飾

    深入了解監(jiān)管機(jī)制

    測量內(nèi)源性或瞬時(shí)表達(dá)的蛋白質(zhì)信號(hào)事件

    驗(yàn)證數(shù)據(jù):泛素檢測試劑盒白書

    試劑盒內(nèi)容

    泛素試劑盒包含以下成分:

    裂解和蛋白質(zhì)定量步驟IP和預(yù)澄清步驟洗滌步驟洗脫步驟西方步驟

    BlastR™裂解緩沖液

    BlastR™稀釋緩沖液

    BlastR™過濾器

    蛋白酶抑制劑雞尾酒

    去泛素酶抑制劑Cocktail

    Precision Red™蛋白質(zhì)測定試劑

    泛素親和珠

    泛素控制珠

    BlastR™沖洗緩沖液

    旋轉(zhuǎn)柱

    珠子洗脫緩沖液

    化學(xué)發(fā)光試劑A

    化學(xué)發(fā)光試劑B

    抗泛素HRP抗體

    示例結(jié)果

    這些試劑盒有許多應(yīng)用(見下一節(jié)),我們在這里描述Rac1蛋白的一個(gè)有趣應(yīng)用:

    應(yīng)用1:調(diào)查高度瞬態(tài)調(diào)節(jié)事件

    Rho蛋白家族的活性,包括Rac1,已知在一定程度上通過泛素化(也稱為泛素化)事件來調(diào)節(jié),泛素化事件可以導(dǎo)致

    在這一研究領(lǐng)域可以嘗試的其他實(shí)驗(yàn)包括:

    參與Rac1單泛素化和多泛素化的泛素酶或去泛素酶的藥理學(xué)研究

    研究在各種不同生長因子或藥物治療下Rac1激活和泛素化之間的關(guān)系。

    檢查泛素化Rac1與效應(yīng)物的相互作用。

    檢查泛素化Rac1Rac1的其他調(diào)節(jié)性PTM之間的串?dāng)_。

    欲了解更多信息,請聯(lián)系

    關(guān)聯(lián)產(chǎn)品:

    Signal Seeker™磷酸酪酸檢測試劑盒(目錄號(hào)BK160

    Signal Seeker™SUMOylation 2/3檢測套件(類別號(hào)BK162

    Signal Seeker™BlastR™快速裂解物制備試劑盒(目錄號(hào)BLR01

    Signal Seeker™泛素親和珠(類別號(hào)UBA01B珠)

    Signal Seeker™PTMtrue™泛素抗體(目錄號(hào)AUB01

    BlastR快速裂解物制備試劑盒

    BlastR快速裂解物制備試劑盒(50個(gè)過濾器)

    SKU BLR01

    數(shù)據(jù)表

    MSDS

    數(shù)量/包裝

    BlastR™過濾器與變性緩沖液(如胍、尿素或通常產(chǎn)生豐富粘度的高SDS基提取緩沖液)結(jié)合使用時(shí),可以快速可靠地制備無基因組DNAgDNA)的細(xì)胞裂解物,用于蛋白質(zhì)印跡或免疫沉淀。gDNA污染是變性緩沖液的一個(gè)重要問題,變性緩沖液可能干擾下游應(yīng)用,如SDS-PAGE中蛋白質(zhì)的免疫沉淀和遷移。與超聲處理或胰島素針gDNA剪切方法不同,BlastR™過濾器可有效去除gDNA污染,同時(shí)對裂解物中蛋白質(zhì)的完整性沒有影響。

    產(chǎn)品用途包括

    降低樣品粘度

    蛋白質(zhì)提取物的快速分離

    變性裂解緩沖液提取物的制備

    驗(yàn)證數(shù)據(jù):Blaster快速過濾套件白書

    示例結(jié)果

    BlastR™裂解物gDNA的澄清

    A) 將粘性樣品裂解液裝載到BlastR™過濾器上。

    B) 樣品通過捕獲gDNA的過濾系統(tǒng)。>細(xì)胞裂解物中蛋白質(zhì)的回收率為90%

    裝載BlastR™過濾器收集低粘度提取物

    BlastR™與常用的非變性和變性裂解緩沖液的比較。從膜、細(xì)胞質(zhì)、線粒體和細(xì)胞核中分離蛋白質(zhì)。

    A431細(xì)胞用BlastR™RIPAmPERIP裂解、變性(1%SDS)和萊姆利裂解緩沖液裂解。使用各自的隔室標(biāo)記蛋白來確定從膜、細(xì)胞質(zhì)、線粒體和核標(biāo)記物中分離蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)印跡圖突出了BlastR™緩沖液與其他變性緩沖液類似地從所有細(xì)胞隔室中分離蛋白質(zhì)的能力。與變性緩沖液不同的是,BlastR™緩沖液與標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)測定法兼容,這在同等條件下是至關(guān)重要的

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